fa راه اندازی و به کارگیری یک روش Multiplex Real-time RT-PCR حساس برای تشخیص همزمان ویروس‌ نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونه‌های پلاسما عفونی Infection زمینه و هدف: ویروس‌ نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C از جمله مهم‎ترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون محسوب می‌شوند و از این رو تشخیص صحیح، دقیق و حساس این ویروس‌ها در افراد آلوده و خون‌های اهدایی از اهمیت بسیاری برخوردار است. به علت وجود برخی از محدودیت‌های روش‌های سرولوژیک در تشخیص این عوامل عفونی، هدف این مطالعه استفاده از روش‌های مولکولی سریع و حساس همچون Real-time PCR می‎باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه آزمایشگاهی، یک روش Real-time PCR Multiplex خانگی بر مبنای استفاده از رنگ SYBR GreenI راه اندازی شد که در آن با استفاده از آنالیز منحنی ذوب می‌توان عفونت منفرد و یا هم زمان ویروس‌ نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C را در نمونه‌های پلاسمای بیماران شناسایی نمود. آنالیز آماری با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 16 انجام شد یافته‌ها: نتایج به دست آمده از انجام واکنش‌های مختلف بر روی چندین نمونۀ بالینی نشان داد که حساسیت تجزیه‎ای (آنالیتیکی) روش راه اندازی شده برای ویروس نقص سیستم ایمنی نوع 1 معادل 200 کپی در هر میلی لیتر 200 و برای ویروس هپاتیت C برابر 100 کپی در هر میلی لیتر است. به علاوه نشان داده شد که پرایمرهای طراحی شده برای هر ویروس هیچ‌گونه واکنش متقاطعی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله گر ندارند. نتیجه گیری: با توجه به سطح حساسیت و ویژگی مناسب، کاربرد آسان، هزینه نسبتاً کم و آنالیز سریع نمونه‌ها، این روش می‌تواند یک روش سریع و مناسب برای تشخیص موثر و آسان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونه‌های پلاسما باشد. Background: HIV-1 and HCV are two of the most important blood-borne infectious agents. Hence, reliable, precise, and sensitive detection of these viruses in infected patients and donated blood units is highly important. Noticing the limitations of serological assays in detection of these infectious agents, this study was to use fast and sensitive molecular assays like real-time PCR. Materials and Methods: In this trial, a home-brewed SYBR green-based multiplex real time PCR, on the basis of melting curve analysis, was developed for the single or simultaneous detection of HCV and HIV-1 infections in plasma samples. Data were analyzed using SPSS software version 16. Results: The results obtained from different reactions on several clinical samples showed that the analytical sensitivities of the developed assay for HIV-1 and HCV were 200 and 100 copies/ml, respectively. It was also shown that the primers designed for each virus had no interaction with each other and other interfering agents. Conclusion: Noticing the good level of sensitivity and specificity, easy handling, relatively low cost, and rapid analysis of samples, this method can be a useful and rapid approach for simple and effective detection of HCV and HIV-1 in plasma samples. HIV-1، HCV، مالتیپلکس، Real-time RT-PCR، راه اندازی، SYBR GreenI HCV, HIV-1, Multiplex, Real-time PCR, SYBR Green 1 10 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1016-1&slc_lang=fa&sid=1 Mahdi Paryan مهدی پریان mparyan@gmail.com 4600319475328460014733 4600319475328460014733 Yes Mahdieh Mondanizadeh مهدیه موندنی‌زاده m_mondanizadeh@yahoo.com 4600319475328460014734 4600319475328460014734 No Samira Mohammadi-Yeganeh سمیرا محمدی یگانه smyeganeh@gmail.com 4600319475328460014735 4600319475328460014735 No Behzad Khansarinejad بهزاد خوانساری نژاد khansarinejad@gmail.com 4600319475328460014736 4600319475328460014736 No