fa مهار بیان ژن نوکلئوستمین به واسطه siRNA باعث مهار رشد، توقف چرخه سلولی و القای آپوپتوز در رده سلولی K562 لوسمی انسانی می‎شود علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle زمینه و هدف: نوکلئوستمین نقش عمده‎ای در کنترل رشد و خودنوزایی سلول‎های بنیادی و سرطانی ایفا می‎کند. بنابراین مهار بیان نوکلئوستمین می‎تواند به عنوان عامل بالقوه در درمان سرطان محسوب شود. در مطالعه حاضر، اثرات سرکوب بیان ژن نوکلئوستمین در رده سلولی K562 مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روش‎ها: در این مطالعه تجربی، پس از تیمار سلول‎های K562 با siRNA اختصاصی نوکلئوستمین، تغییر در الگوی بیان نوکلئوستمین با واکنش رونویسی معکوس نیمه کمی بررسی گردید. آزمون دفع رنگ تریپان بلو و آزمون جذب نمک تترازولیوم و میکروسکوپ فلورسنت به ترتیب به منظور بررسی مهار رشد و مرگ سلولی سلول‎های K562 به کار گرفته شد. از فلوسایتومتری برای بررسی اثرات مهار ژن نوکلئوستمین بر چرخه سلولی استفاده گردید. یافته‎ها: نتایج نشان داد که ژن نوکلئوستمین بیان بالایی در سلول‎های K562 دارد. تیمار سلول‎های K562 باsiRNA اختصاصی نوکلئوستمین در غلظت 200 نانومولار پس از 48 ساعت، سطح mRNA نوکلئوستمین را در مقایسه با سلول‎های کنترل به میزان 55 درصد مهار کرد. 48 ساعت پس از ترانسفکشن، رشد سلول‎ها به میزان 7/33 درصد کاهش یافت. هم‎چنین مهار بیان ژن نوکلئوستمین منجر به مهار چرخه سلولی در مرحله G1 شد. نتایج حاصل از میکروسکوپ فلوروسنت نشان داد که آپوپتوز، 48 ساعت پس از خاموشی بیان ژن نوکلئوستمین رخ می‎دهد. نتیجه گیری: با توجه به اثرات قوی مهار رشدی و آپوپتوزی siRNA نوکلئوستمین در سلول‎هایK562 لوسمی میلوئید انسانی، خاموشی بیان این ژن می‎تواند به عنوان یک هدف بالقوه در مهار سلول‎های K562، به عنوان مدل سلول بنیادی لوسمی میلوئیدی مزمن باشد. Background: Nucleostemin plays a critical role in controlling proliferation and self-renewal of stem cells and cancer cells. Thus, inhibition of nucleostemin expression could be a potent therapeutic approach in cancer treatment. In the present study, the effects of nucleostemin gene silencing in K562 cell line were studied. Materials and Methods: In this experimental study, after transfecting NS-specific siRNA into K562 cells, changes in nucleostemin gene expression pattern were determined by semi-quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Trypan blue exclusion test, MTT assay, and fluorescent microscopy were used to evaluate the growth inhibition and apoptosis of K562 cells, respectively. Flow-cytometery was utilized for evaluating the effects of nucleostemin gene silencing on cell cycle. Results: The results showed the high expression of nucleostemin gene in K562 cells. NS-siRNA transfection into K562 cells at 200 nM inhibited the nucleostemin mRNA level up to 55% after 48 hours when compared to corresponding control cells. Forty eight hours after transfection, the cell growth decreased up to 33.7%. In addition, the silencing of nucleostemin induced G1 cell cycle arrest. Furthermore, fluorescent microscopy assays indicated that apoptosis occurred 48 hours after silencing nucleostemin gene expression. Conclusion: Noticing the potent growth inhibitory and apoptotic effects of nucleostemin siRNA in human myeloid leukemia K562 cells, silencing this gene can be a potential target for inhibiting K562 cells as the stem cell model of chronic myeloid leukemia. آپوپتوز، لوسمی میلوئیدی مزمن، نوکلئوستمین، siRNA Apoptosis, Chronic myelogenous leukemia, Nucleostemin, SiRNA 104 116 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-716-4&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Amin Moosavi سید محمد امین موسوی moosav_m@tabrizu.ac.ir 4600319475328460015393 4600319475328460015393 Yes Negin Seyed Gogani نگین سید گوگانی 4600319475328460015394 4600319475328460015394 No Iraj Asvadi Kermani ایرج اسودی کرمانی 4600319475328460015395 4600319475328460015395 No Hematology and Oncology Research Center, The Medical Science University of Tabriz, مرکز تحقیقات هماتولوژی انکولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز Masood Asadi مسعود اسدی 4600319475328460015396 4600319475328460015396 No Department of Pharmacology, The Medical Science University of Tabriz, دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز