fa ارزیابی خواص ضد سرطانی هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم (50 هرتز ) بر سلول‌های سرطان رده‌ی تخمدان (A2780) علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:101%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">مقدمه:</span></span></span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">هارمین، یک آلکالوئید از دسته کربولین از خانواده اسپند و گیاهی است که در طب سنتی کاربرد فراوانی دارد. مطالعات متعددی بر اثرات ضد سرطانی آن تأکید می‌کند. از آن‌جایی که فرایندهای بیولوژیکی تحت تأثیر میدان‌های الکترومغناطیسی می‌باشند، در مطالعه حاضر اثرات ضد سرطانی هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم بر بیان ژن‌های </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">COX2</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">، </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">A</span></span></span></span> <span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">VEGF</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> و </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">MMP-2</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> در رده سلولی </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">A2780</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> بررسی شد</span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">. </span></span></span></span><span lang="FA" style="line-height:101%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:104%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">روش کار:</span></span></span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">در این پژوهش تجربی- آزمایشگاهی، رده‌ سلولی سرطان تخمدان در 4 گروه شاهد، هارمین با غلظت‌های (6، 12، 24، 48، 96، 192 میکرومولار)، میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گوس و هارمین با غلظت 48 میکرو مولار و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گاوس به صورت تصادفی تقسیم شدند. سمیت آن‌ها با آزمون </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">MTT</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">، تغییرات ریخت‌شناسی هسته با رنگ‌آمیزی </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">DAPI</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">، اثرات آپوپتوزیس این ترکیبات با اندازه‌گیری نیتریک اکساید </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">NO)</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">)</span></span></span></span> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">و</span></span></span></span> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">تغییرات بیان ژن‌ها نیز به روش </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">Real Time PCR</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> بررسی گردید</span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">.</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> داده‌‌های کمی با استفاده از آزمون آماری </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">ANOVA</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> در سطح 0/05 > </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">P</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> تجزیه و تحلیل شدند</span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:104%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">. </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:104%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="line-height:102%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span calibri="" style="font-family:"><b><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">یافته‌ها:</span></span></span></span></b> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">مقایسه داده‌های کمی این پژوهش نشان داد که هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم و شدت 50 گوس به صورت وابسته به غلظت باعث کاهش زیست‌پذیری در سلول‌های سرطان تخمدان شد و همچنین در تست نیتریک اکساید گروه شاهد</span></span></span></span> <span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">با گروه‌های تیماربا غلظت 48 میکرومولار و هم‌افزایی با میدان الکترومغناطیسی با فرکانس 50 گوس کاهش معنی‌دار یافته است (0/05 > </span></span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">P</span></span></span></span><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">)، بیان ژن‌های فوق در سلول‌های تحت تیمار کاهش معنی‌دار نشان داد و تیمار سلول‌های سرطان تخمدان با هارمین و کاربرد توأم آن باعث تغییرات ریخت‌شناسی هسته ازجمله تراکم کروماتین، تشکیل اجسام آپوپتوزی و چروکیدگی غشای سلول شد</span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:102%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">.</span></span></span></span> <span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:102%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br> <b><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">نتیجه گیری:</span></span></span></span></b> <span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">کاربرد توأم هارمین و میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم، باعث القای آپوپتوزیس در سلول‌های سرطانی </span></span></span></span><span style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">A2780</span></span></span></span><span dir="RTL" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> و سبب کاهش بیان ژن‌های </span></span></span></span><span style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">COX2</span></span></span></span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> و</span></span></span></span><span style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">A</span></span></span></span> <span style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">VEGF</span></span></span></span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> و </span></span></span></span><span style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="color:black">MMP-2</span></span></span></span><span dir="RTL" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black"> شد. در نتیجه کاربرد توأم هارمین با میدان الکترومغناطیسی با فرکانس کم به دلیل داشتن سمیت سلولی مؤثر در مهار تکثیر و القا آپوپتوز می‌تواند کاندیدای مناسبی جهت مطالعات کلینیکی باشد</span></span></span></span><span dir="RTL" lang="AR-SA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:115%"><span b="" nazanin="" style="font-family:"><span style="color:black">.</span></span></span></span> <span style="font-size:11pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:115%"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet="">Introduction:</span></span></span></b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet=""> Harmine is an alkaloid from the carboline family, belonging to the harmal plant, which has extensive applications in traditional medicine, with numerous studies highlighting its anti-cancer effects. Since biological processes are influenced by electromagnetic fields, the current study examined the anti-cancer effects of harmine and low-frequency electromagnetic fields on the expression of COX2, VEGF, and MMP-2 genes in the A2780 cell line.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:115%"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet="">Methods:</span></span></span></b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet=""> In this experimental-laboratory study, ovarian cancer cell lines were randomly divided into four groups: control, harmine at concentrations of 6, 12, 24, 48, 96, and 192 micromolar, low-frequency electromagnetic field with an intensity of 50 Gauss, and harmine at a concentration of 48 micromolar with a low-frequency electromagnetic field of 50 Gauss intensity. Their toxicity was assessed using the MTT assay, nuclear morphological changes by DAPI staining, apoptotic effects of these compounds by measuring nitric oxide (NO), and gene expression changes by Real-Time PCR. Quantitative data were analyzed the ANOVA statistical test at a P < 0.05 level.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:11pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:115%"><span calibri="" style="font-family:"><b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet="">Results: </span></span></span></b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet="">Quantitative data comparison of this research indicated that harmine and a low-frequency electromagnetic field with an intensity of 50 Gauss caused a concentration-dependent reduction in the viability of ovarian cancer cells. Additionally, in the nitric oxide test, a significant decrease was found in the control group compared to the groups treated with a concentration of 48 micromolar and synergized with a 50 Gauss electromagnetic field (p<0.05). The expression of the aforementioned genes in treated cells showed a significant decrease. Treating ovarian cancer cells with harmine and its combined application led to significant nuclear morphological changes, including chromatin condensation, formation of apoptotic bodies, and wrinkling of the cell membrane.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet="">Conclusions:</span></span></span></b><span style="font-size:8.0pt"><span style="line-height:115%"><span ms="" style="font-family:" trebuchet=""> The combined application of harmine and a low-frequency electromagnetic field induced apoptosis in A2780 cancer cells and resulted in the downregulation of COX2, VEGF-A, and MMP-2 gene expression. Consequently, the combined use of harmine with a low-frequency electromagnetic field, due to its effective cytotoxicity in inhibiting proliferation and inducing apoptosis, could be a suitable candidate for clinical studies.</span></span></span> رده سلولی A2780؛ هارمین؛ میدان الکترومغناطیسی A2780 cell line, Harmine, Electromagnetic field 137 145 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-7426-1&slc_lang=fa&sid=1 Malihe Keykhapour ملیحه کیخاپور m.keykhapoor@gmail.com 4600319475328460088359 0009-0004-2730-2786 No Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران Javad Baharara جواد بهارآرا baharara@yahoo.com 4600319475328460088360 4600319475328460088360 Yes Department of Biology and Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست‌شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران Hamed Hatami حامد حاتمی HATAMIHTM1368@gmail.com 4600319475328460088361 4600319475328460088361 No Department of Hematology, Samen- Al- Aimah Hospital, North Khorasan Social Security Organization, Bojnurd, Iran گروه هماتولوژی بیمارستان ثامن الائمه، سازمان تامین اجتماعی خراسان شمالی، بجنورد، ایران Maryam Lotfi مریم لطفی maryam.lotfi74@yahoo.com 4600319475328460088362 0009-0003-1443-6067 No Department of Biology and Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست‌شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران Sajad Farrokhyar سجاد فرخ یار sajadfarrokhyar@gmail.com 4600319475328460088363 4600319475328460088363 No Department of Biology and Research Center for Animal Development Applied Biology, Mashhad Branch Islamic Azad University, Mashhad, Iran گروه زیست‌شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد مشهد، ایران