fa شناسایی وتعیین خصوصیات سلول‌های بنیادی سرطانی کولون در رده سلولی آدنوکارسینوم کولونی 29HT- علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle <p style="text-align: justify"><strong>زمینه و هدف</strong>: یکی از ویژگی‌های سلول‌های بنیادی سرطانی توانایی آنها در تشکیل کلنی‌های اسفروییدی تحت شرایط غیر چسبان و در محیط فاقد سرم می‌باشد. هدف از این مطالعه جداسازی سلول‌های بنیادی سرطانی با استفاده از روش تشکیل اسفرویید و بررسی خصوصیات عملکردی آنها در رده سلولی سرطانی آدنوکارسینوم کولونی 29HT- می‌باشد.</p> <p style="text-align: justify"><strong>مواد و روش‌ها</strong>: در این مطالعه تجربی، شاخص‌های سلول‌های بنیادی سرطانی کولون شامل 44 CDو EPCAM و میزان بیان ژن‌های مرتبط با مسیرهای اختصاصی سلول‌های بنیادی سرطانی در اسفروییدها و سلول‌های 29HT- مورد بررسی قرار گرفت. جهت تعیین توانایی تومورزایی اسفروییدها نیز، پیوند زنوگرافت در موش‌های nude انجام گردید.</p> <p style="text-align: justify"><strong>یافته‌ها</strong>: بر اساس اطلاعات به دست آمده بیش از 92 درصد از اسفروییدها +44 CD/EPCAM+ بودند در حالی که فقط 37 درصد از سلول‌های 29HT- شاخص‌های 44 CD/EPCAM را بیان می‌کردند. در مقایسه با سلول‌های 29HT- میزان بیان ژن‌های 2,Sox4 OctNanog، 4Klf و C-myc به طور قابل ملاحظه‌ای در سلول‌های اسفروییدی افزایش نشان داد(05/0>p). هم‌چنین تزریق2500 سلول اسفروییدی برای شروع و رشد تومور در موش‌های nude کافی بود در حالی که 106×1 سلول 29HT- توانایی القاء تومور را داشتند.</p> <p style="text-align: justify"><strong>نتیجه‌گیری</strong>: یافته‌ها نشان می‌دهد اسفروییدهای تشکیل شده از رده سلولی سرطانی کولون 29HT- غنی از سلول‌های بنیادی سرطانی می‌باشند که بیان افزایش یافته‌ای از ژن‌های درگیر در ویژگی‌های چند قوه‌زایی و هم‌چنین توانایی توموزایی در موش‌های nude را نشان می‌دهند.</p> <p style="text-align: justify"><strong><em>Background</em></strong>: Cancer stem cells are subpopulation of cancer cells that show self-renewal potential and the capacity to differentiate into diverse populations comprising a tumor. One of the characteristics of CSCs is their ability to form floating spheroids under anchorage-independent conditions in a serum-free media. The aim of this study was isolation of colon cancer stem cells by sphere formation assay and characterization of them in human colonic adenocarcinoma HT-29.</p> <p style="text-align: justify"><strong><em>Materials and Methods</em></strong>: In this experimental study, colon CSCs markers including CD44 and EPCAM in spheroid and HT-29 cells were analyzed by flow cytometry. The expression levels of stemness genes in both spheroid and HT-29 cells were investigated using real-time PCR. Tumorigenic potential of spheroid cells was evaluated using in vivo xenografts assay.</p> <p style="text-align: justify"><strong><em>Results</em></strong>: Our data showed over 92% of spheroids were CD44+/EpCAM+, while HT-29 cells only have expressed 37% of CD44/EpCAM markers. In compared with the HT-29 cells, expression levels of ‘‘stemness’’ genes, like Sox2, Oct4, Nanog, C-myc, and Klf4 were significantly increased in spheroid cells (p< 0.05). Further, As little as 2500 spheroid cells were sufficient to obtain tumor growth in nude mice, while 1x106 of HT-29 cells was needed to form tumor.</p> <p style="text-align: justify"><strong><em>Conclusion</em></strong>: Our data suggest that spheroid formed by colon cancer cell lines highly enriched in CSCs and showed increasing expression of stemness genes and tumorigenic in nude mice.</p> اسفرویید, سلول‌های بنیادی سرطانی, 44CD, EPCAM, 29HT- Cancer stem cells, CD44, EPCAM, HT-29, Spheroid 21 30 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2872-1&slc_lang=fa&sid=1 Samaneh Khorrami سمانه خرمی 4600319475328460043087 4600319475328460043087 No Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشجوی دکتری ایمنی شناسی پزشکی، گروه ایمنی شناسی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Ahmad Zavaran Hosseini احمد زواران حسینی Zavarana@modares.ac.ir 4600319475328460043088 4600319475328460043088 Yes Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran ایران، تهران، دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده علوم پزشکی، گروه ایمنی شناسی پزشکی Seyed Javad سیدجواد مولی sjmowla@modares.ac.ir 4600319475328460043089 4600319475328460043089 No Department of Molecular Genetics, Faculty of Biological Sciences , Tarbiat Modares University, Tehran, Iran دانشیار، گروه ژنتیک مولکولی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Reza Malekzadeh رضا ملک زاده malek@tums.ac.ir 4600319475328460043090 4600319475328460043090 No Digestive Oncology Research Center, Digestive Diseases Research Institute, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد، گروه تحقیقات سرطان ، پژوهشکده بیماری های گوارشی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران