fa تشخیص افتراقی ساب تایپ‌های مختلف ویروس آنفلوانزا تایپ A با استفاده از روش RT-PCR-RFLP عفونی Infection پژوهشي اصیل Original Atricle زمینه و هدف: ویروس آنفلوانزای تایپ A یکی از مهم‌ترین عوامل ویروسی بیماری‌های تنفسی است. تغییرات ژنتیکی این ویروس باعث بروزاپیدمی‌های جدید در سرتاسر دنیا می‌شود. از این رو وجود یک تکنیک تشخیصی دقیق به منظور تشخیص سریع سویه‌های در حال گردش ضروری می‌باشد. این مطالعه با هدف به کارگیری یک روش سریع جهت افتراق ساب تایپ‌های ویروس آنفلوانزا تایپ A انجام گرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی واکنش RT-PCR با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی ژن ماتریکس بر روی ساب تایپ‌های H1N1، H3N2، H5N1 و H9N2ویروس آنفلوانزا انجام شد. سپس محصول PCR تحت تاثیر هضم آنزیمی آنزیم‌های آندونوکلئاز اختصاصی هر ساب تایپ قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج به دست آمده از واکنش RT-PCR نشان داد که جفت پرایمر مربوط به ژن ماتریکس کاملا اختصاصی بوده و قادر به تکثیر کلیه ساب تایپ‌های مورد مطالعه می‌باشد. هم‌چنین در اثر واکنش هضم آنزیمی بر روی قطعات تکثیر یافته از ژن ماتریکس مربوط به ساب تایپ‌های مختلف، الگوی‌های متفاوتی بر اساس طول قطعات(RFLP) به دست آمد. نتیجه‌گیری: واکنش RT-PCR ویروس آنفلوآنزا به همراه RFLP بر اساس ژن ماتریکس می‌تواند روش مناسبی جهت شناسایی ساب تایپ‌های مورد مطالعه ویروس آنفلوانزای تایپ A باشد. Background: Influenza type A virus is one of the most important viral agents in human respiratory diseases. The genetic variability of the influenza viruses leads to the incidence of new epidemics worldwide. Hence, there is a growing need for rapid and effective new methods capable of detection and differentiation of influenza virus circulating strains. This study was done to develop a method for rapid differentiation of the subtypes of influenza type A virus. Materials and Methods: In this experimental study, reverse-transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) were performed using a primer set based on M gene of H1N1, H3N2, H5N1, and H9N2 influenza subtypes. Then the amplified fragments were subjected to digestion using subtype specific restriction endonuclease enzymes. Results: The results of PCR reaction showed that the primer pair of the M gene was specific and capable of amplifying all influenza subtypes understudy. Also, different restriction fragment length polymorphism patterns (RFLP) were generated using enzyme digestion reaction on the amplified segment of M gene. Conclusion: RT-PCR and RFLP analysis of the M gene can be employed as a useful method for differentiating influenza virus subtypes تشخیص افتراقی، ویروس آنفلونزای تیپA، واکنش زنجیرهای پلی مراز، RFLP Differential diagnosis, influenza type A virus, polymerase chain reaction, RFLP 77 84 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1578-2&slc_lang=fa&sid=1 Esmaiel Saberfar اسماعیل صابرفر saberfar@yahoo.com 4600319475328460021391 4600319475328460021391 Yes applied virology research مرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی Zahra Goodarzi زهرا گودرزی 4600319475328460021392 4600319475328460021392 No applied virology research center مرکز تحقیقات کاربردی ویروس شناسی Ali Najafi علی نچفی 4600319475328460021393 4600319475328460021393 No molecular biology center, baqyatallah univesity of medical sciences مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی،دانشگاه