سعید حاجی هاشمی،
دوره ۱۲، شماره ۱ - ( ۳-۱۳۸۸ )
چکیده
مقدمه: در این مطالعه اثر فسفوریله و دفسفوریله کننده اسید امینه سرین جایگاه ۳۶۲ برروند آندوسیتوزکانال پتاسیمی نوع ۲ قسمت خارجی مدولا کلیه پس از بیان درغشاء اووسیت بررسی گردیده است. روش کار: در این مطالعه تجربی اووسیتهای زاینوپوس لویس با استفاده از کلاژناز به روش استاندارد جدا گردیدند. روش تغییر سریع جهت ایجاد موتاسیون در انتهای کربوکسیل کانال پتاسیمی نوع ۲ قسمت خارجی مدولا کلیه استفاده گردید. cRNA مربوط این کانال وموتاسیون های S۳۶۲Aو S۳۶۲D ایجاد شده به اووسیتها تزریق گردید. پس از سه روز (زمان صفر) به محیط کشت برفلدین A، مهار کننده انتقال پروتئینهای ساخته شده به غشاء به مقدار ۲۵ میکرومولار یا اتانول به عنوان حلال برفلدین A اضافه گردید. از تکنیک ثابت نگه داشتن ولتاژ دو الکترود برای اندازه گیری جریانهای یونی وهمچنین پتانسیل غشاء استفاده شد. نتایج: اووسیتهای که کانالهای پتاسیمی نوع ۲ قسمت خارجی مدولا کلیه و یا موتاسیون فسفوریله کننده S۳۶۲D را بیان میکردند در طی دوره انکوبه شدن در محلول برفلدین A کاهش معنیداری در میزان جریان یون پتاسیم وپتانسیل غشاء را نشان دادند. میزان کسر جریان برای کانالهای پتاسیمی نوع ۲ قسمت خارجی مدولا کلیه و موتاسیون فسفوریله کننده پس از ۴۸ ساعت انکوبه شدن در برفلدینA برابر با ۰۵/۰±۱۱/۰ بود که به طور معنیداری باکسر جریان مربوط به موتاسیون دفسفوریله کننده ۰۵/۰±۹۶/۰ تفاوت داشت. نتیجه گیری: اسید آمینه سرین جایگاه ۳۶۲ در قسمت داخلی ناحیه PDZ با ایجاد حالت فسفوریله در آندوسیتوز و تعیین تعداد کانالهای پتاسیمی نوع ۲ قسمت خارجی مدولا کلیه دخالت دارد.