[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 15، شماره 10 - ( ماهنامه اسفند 1391 ) ::
جلد 15 شماره 10 صفحات 43-53 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و بیان پروتئین نوترکیب VP2 پارو ویروس سگی در دو سیستم باکتریایی و پروکاریوتی بدون سلول
روح الله درستکار، طراوت بامداد ، اسماعیل صابرفر
دانشيار دانشگاه تربیت مدرس ، Bamdad_T@modares.ac.ir
چکیده:   (7331 مشاهده)
زمینه و هدف: اهمیت پروتئین VP2 پاروویروس سگی در اتصال به سلول‎های سرطانی انسانی و کیت‎های تشخیصی دامپزشکی سبب شده تا مطالعات گسترده‎ای در زمینه تولید این پروتئین صورت گیرد. هدف از انجام این پژوهش کلونینگ و تایید بیان پروتئین پوششی VP2 پاروویروس سگی در سیستم پروکاریوتی و بهینه نمودن بیان پروتئین VP2 در سیستم منحصر به فرد پروکاریوتی بدون سلول می‎باشد. مواد و روش‎ها: در این مطالعه تجربی، پلاسمید pET-21a VP2 با کلون کردن محصول PCR ژن VP2 پاروویروس سگی در پلاسمید بیانی pET-21a ساخته شد. توالی کلون شده ابتدا با روش کلونی PCR ارزیابی شده، سپس توسط هضم آنزیمی و توالی یابی مورد بررسی قرار گرفت. به منظور تولید پروتئین VP2 پلاسمید pET-21a VP2 در باکتری E.coli سویه روزتا Rosetta(DE3) منتقل و بیان این پروتئین توسط IPTG القاء گردید. پروتئین تولید شده در هر دو شرایط باکتریایی و بدون سلول توسط تکنیک SDS PAGE بررسی گردید و در نهایت به وسیله آنتی بادی منوکلونال علیه VP2 توسط تکنیک وسترن بلات ارزیابی گردید. یافته‎ها: کلونینگ صحیح ژن VP2 با هضم آنزیمی و تعیین توالی قطعه کلون شده به اثبات رسید. بیان پروتئین VP2 در دو سیستم باکتریایی و بدون سلول توسط SDS PAGE تایید شده و در نهایت پروتئین VP2 به وسیله وسترن بلات تایید گردید. نتیجه‎گیری: نتایج این تحقیق نشان داد، ژن VP2 در طی مراحل کلونینگ تکثیر شده و به خوبی در وکتور مورد نظر کلون گردیده است و بیان پروتئین در هر دو سیستم باکتریایی و بدون سلول به طور کامل مورد تایید قرار گرفته است.
واژه‌های کلیدی: سیستم بدون سلول، بیان پروتئین سطحی، پاروویروس، ژن VP2
متن کامل [PDF 345 kb]   (1360 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل | موضوع مقاله: علوم پايه
دریافت: ۱۳۹۱/۴/۲۷ | پذیرش: ۱۳۹۱/۷/۱
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Dorostkar R, Bamdad T, Saberfar E. Expression and cloning of recombinant VP2 protein of canine parvovirus in bacterial and cell-free prokaryotic systems. amuj. 2013; 15 (10) :43-53
URL: http://amuj.arakmu.ac.ir/article-1-1831-fa.html
درستکار روح الله، بامداد طراوت، صابرفر اسماعیل. کلونینگ و بیان پروتئین نوترکیب VP2 پارو ویروس سگی در دو سیستم باکتریایی و پروکاریوتی بدون سلول. مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك. 1391; 15 (10) :43-53

URL: http://amuj.arakmu.ac.ir/article-1-1831-fa.html

دوره 15، شماره 10 - ( ماهنامه اسفند 1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک Arak Medical University Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.059 seconds with 791 queries by yektaweb 3506